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Mirin

Mirin is a potent Mre11–Rad50–Nbs1 (MRN) complex inhibitor, and inhibits Mre11-associated exonuclease activity. Mirin inhibits MRN-dependent activation of ATM.

Mirin化学構造

CAS No. 1198097-97-0

サイズ 価格(税別) 在庫状況
10mM (1mL in DMSO) JPY 29500 国内在庫なし(納期7~10日)
JPY 22000 国内在庫あり
JPY 44500 国内在庫あり
JPY 298500 国内在庫なし(納期7~10日)

代表番号: 045-509-1970|電子メール：[email protected]
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シグナル伝達経路

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ATM/ATR阻害剤の選択性比較

生物活性

製品説明 Mirin is a potent Mre11–Rad50–Nbs1 (MRN) complex inhibitor, and inhibits Mre11-associated exonuclease activity. Mirin inhibits MRN-dependent activation of ATM.
Targets
MRN [1] ATM [1]
In Vitro
In vitro

Mirin inhibits DSB-induced ATM activation, the ATM-dependent phosphorylation of the downstream targets Nbs1 and Chk2 and the MRN-dependent autophosphorylation of ATM at Ser1981 in response to DSBs. Mirin also inhibits the G2 checkpoint in TOSA4 cells, and homology-dependent DNA repair in HEK293 cells. [1]

In cells with integrated HPV16 (SiHa), Mirin sensitizes HPV episomes to PA25 resulting in a ∼5-fold reduction of the PA25 IC50. [2]

Pretreatment with mirin also decreases cell viability and inhibits proliferating cell nuclear antigen expression in cisplatin-treated human embryonic kidney 293 cells. [3]
Kinase Assay Nuclease assay
Reactions with oligonucleotide nonhairpin substrates contains 25 mM MOPS (pH 7.0), 60 mM KCl, 0.2% Tween 20, 2 mM DTT, 1 mM or 5 MnCl2 (or 5 mM MgCl2, or 5 mM CaCl2), 0.1 pmol of DNA substrate, and 0.3 pmol of Mre11 (or an equivalent amount of Mre11 complexed with Rad50) in a volume of 10 μl, and are incubated at 37°C for 30 min. SDS, EDTA, and proteinase K are then added to final concentrations of 0.2%, 5 mM, and 0.1 mg/ml, respectively, and incubated for another 15 min. 4 μl of each reaction is mixed with 4 μl of formamide loading buffer, and then loaded onto a sequencing gel containing 10% acrylamide and 7 M urea. After the run, each gel is analyzed using a phosphorimaging system. Reactions containing hairpin substrates are identical to those with nonhairpin substrates except that 3 pmol of Mre11 is added to reactions as indicated, and the reactions are incubated at room temperature overnight. Nonhomologous end-joining reactions contains 25 mM MOPS (pH 7.0), 60 mM KCl, 0.2% Tween 20, 2 mM DTT, 4 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 0.5 mM ATP, 4 ng of plasmid DNA, 10% polyethylene glycol, 0.01 pmol of human DNA ligase I, and 0.06 pmol of Mre11 or 0.1 units of E. coli exonuclease III (GIBCO-BRL), in a volume of 10 μl. After incubation at 37°C for 25 min, Tween 20 is added to a final concentration of 0.5%, and a 2.5 μl aliquot is amplified by PCR using primers DAR5 and DAR147. PCR products are cloned using the TA cloning kit and sequenced using an automated ABI Capillary Genetic Analyzer.
細胞実験 細胞株 HEK 293 cells
濃度 100 μM
反応時間 24 h
実験の流れ

Human embryonic kidney (HEK) 293 cells are maintained in RPMI-1640 supplemented with 5% heat-inactivated fetal bovine serum, penicillin (100 U/mL), and streptomycin (100 mg/mL) in humidified air with 5% CO2 at 37 °C. Cells are given fresh medium at 48 h intervals. The cells are seeded in 96-well plates in regular growth medium. Cells are pretreated with mirin (100 μM for 1 h before the cisplatin (20 μM) treatment followed by incubation for 8 and 24 h. The MTT assay is performed using the EZ-Cytox cell viability assay kit according to the manufacturer's protocol and MTT reduction is measured at a 450 nm wavelength using a micro-plate reader.
実験結果図 Methods Biomarkers 結果図 PMID
Growth inhibition assay Cell viability 18176557
In Vivo
In Vivo

Mirin in nanoparticles resulted in a sharp impairment of tumor growth, associated with DDR activation, p53 accumulation, and cell death.

化学情報

分子量 220.25 化学式

C10H8N2O2S
CAS No. 1198097-97-0 SDF Download Mirin SDFをダウンロードする
Smiles OC1=CC=C(C=C1)\C=C2/SC(=N)NC2=O
保管

In vitro
Batch:

DMSO : 44 mg/mL ( (199.77 mM)； 吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

モル濃度計算器

in vivo
Batch:

Add solvents to the product individually and in order.

投与溶液組成計算機

実験計算

モル濃度計算器

質量 濃度 体積 分子量

投与溶液組成計算機(クリア溶液)

ステップ１：実験データを入力してください。（実験操作によるロスを考慮し、動物数を1匹分多くして計算・調製することを推奨します）

mg/kg g μL 匹

ステップ２：投与溶媒の組成を入力してください。（ロット毎に適した溶解組成が異なる場合があります。詳細については弊社までお問い合わせください）

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計算結果：

投与溶媒濃度： mg/ml;

DMSOストック溶液調製方法： mg 試薬を μL DMSOに溶解する（濃度 mg/mL, 注：濃度が当該ロットのDMSO溶解度を超える場合はご連絡ください。 )

投与溶媒調製方法：Take μL DMSOストック溶液に μL PEG300，を加え、完全溶解後μL Tween 80，を加えて完全溶解させた後 μL ddH2O，を加え完全に溶解させます。

投与溶媒調製方法：μL DMSOストック溶液に μL Corn oil，を加え、完全溶解。

注意：１.ストック溶液に沈殿、混濁などがないことをご確認ください；
２.順番通りに溶剤を加えてください。次のステップに進む前に溶液に沈殿、混濁などがないことを確認してから加えてください。ボルテックス、ソニケーション、水浴加熱など物理的な方法で溶解を早めることは可能です。

技術サポート

ストックの作り方、阻害剤の保管方法、細胞実験や動物実験の際に注意すべき点など、製品を取扱う時に問い合わせが多かった質問に対しては取扱説明書でお答えしています。

Handling Instructions

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