NEM (N-Ethylmaleimide)

製品コード：S3692 純度：99.96%

NEM (N-Ethylmaleimide) is an organic compound that is derived from maleic acid. It is an irreversible inhibitor of all cysteine peptidases, with alkylation occurring at the active site thiol group. N-Ethylmaleimide (NEM) inactivates endogenous deubiquitinating enzymes (DUBs). N-Ethylmaleimide (NEM) specifically inhibits phosphate transport in mitochondria.

CAS No. 128-53-0

サイズ	価格(税別)	在庫状況
10mM (1mL in DMSO)	JPY 29500	国内在庫あり
25mg	JPY 22000	国内在庫あり
1g	JPY 145500	国内在庫なし(納期7~10日)

代表番号: 045-509-1970\|電子メール：sales@selleck.co.jp よく尋ねられる質問

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Cysteine Protease阻害剤の選択性比較

阻害剤	Citation	Cysteine Protease	Cathepsin	Calpain	Cruzain	Papainb	Cathepsin	その他
Odanacatib	23		++++				++++
E-64	17	+++
Cathepsin G Inhibitor I	0		++				++
LY3000328	1		++++ ++++				++++ ++++
Cruzain-IN-1	0				+++
2-cyano-Pyrimidine	0		+				+
PD 151746	5			+
Calpeptin	24			++		++
Cathepsin Inhibitor 1	6		+++ +				+++ +
PMSF	24	✔						chymotrypsin
Aloxistatin (E64d)	43	✔
Balicatib	0		✔				✔
CA-074 methyl ester (CA-074 Me)	41		✔				✔
Nitroxoline	5		✔				✔
Pepstatin A	33		✔				✔	aspartic protease
Loxistatin Acid (E-64C)	3	✔
Leupeptin Hemisulfate	32	✔						serine protease
Z-FA-FMK	10	✔
MG-101 (ALLN)	18	✔
MDL-28170	8			✔				Secretase

1. "+" indicates inhibitory effect. Increased inhibition is marked by a higher "+" designation. 2. "✔" indicates inhibitory effect, but without specific value.

Cell Data

Cell Lines	Assay Type	Incubation Time	活性情報	PMID
KBV1	Cytotoxicity assay	72 hrs	Cytotoxicity against drug-resistant human KBV1 cells expressing P-gp incubated for 72 hrs by MTT assay, IC50=16μM	21657271
KB-3-1	Cytotoxicity assay	72 hrs	Cytotoxicity against human KB-3-1 cells incubated for 72 hrs by MTT assay, IC50=30μM	21657271
COS7	Function assay	90 mins	Binding affinity to rat Galpha-fused ORL1 receptor expressed in african green monkey COS7 cells after 90 mins, EC50=43.7μM	22061823
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生物活性

製品説明	NEM (N-Ethylmaleimide) is an organic compound that is derived from maleic acid. It is an irreversible inhibitor of all cysteine peptidases, with alkylation occurring at the active site thiol group. N-Ethylmaleimide (NEM) inactivates endogenous deubiquitinating enzymes (DUBs). N-Ethylmaleimide (NEM) specifically inhibits phosphate transport in mitochondria.

In Vitro
In vitro	N-Ethylmaleimide inactivates endogenous deubiquitinating enzymes (DUBs) and specifically inhibits phosphate transport in mitochondria.^[1]
細胞実験	細胞株	HEK293T cells
	濃度	10 mM
	反応時間	14 h
	実験の流れ	For endogenous protein immunoprecipitation, cell lysates are prepared in Pierce IP Lysis Buffer containing protease inhibitors, phosphatase inhibitor and deubiquitinating inhibitor N-Ethylmaleimide (NEM, 10mM). Lysate supernatant is firstly incubated with primary antibody at 4 ℃ for 14 h, and then mixed with Dynabeads Protein G magnetic beads at 4 ℃ for 4 h on a rotator. The magnetic bead-Ab complex is separated by Magnetic Separation Rack and the beads are washed three times with PBST buffer. For SDS-PAGE analysis, the complex-bound beads are resuspended in 1x protein electrophoresis loading buffer and boiled at 100 ℃ for 8 min before the supernatant is collected. For exogenous protein immunoprecipitation, cells are transfected for 48 h before preparation of cell lysates. To prepare negative control, antibody against mouse IgG is used in parallel.

In Vivo
In Vivo	N-Ethylmaleimide is an irreversible cysteine protease (sulfhydryl) inhibitor.
動物実験	動物モデル	Male Sprague-Dawley rats
	投与量	10 mg/kg
	投与経路	s.c.

NCT Number	Recruitment	Conditions	Sponsor/Collaborators	Start Date	Phases
臨床試験 (data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2024-05-22)
NCT00750477	Completed	Osteoarthritis	ESM Technologies LLC	December 2004	Not Applicable
NCT00750230	Completed	Osteoarthritis\|Fibromyalgia	ESM Technologies LLC	October 2003	Not Applicable

参考
[1] Wang B, et al. Cell Rep. 2022 Mar 22;38(12):110538. [2] Matsuda H, et al. Life Sci. 1999;65(2):PL27-32.

参考

化学情報

分子量	125.13	化学式	C₆H₇NO₂
CAS No.	128-53-0	SDF	Download NEM (N-Ethylmaleimide) SDFをダウンロードする
Smiles	CCN1C(=O)C=CC1=O
保管	3年-20°C粉	溶液の保管冷凍と解凍の繰り返しを避けるため小分けにしてください	1年-80°Cin solvent
保管	3年-20°C粉	溶液の保管冷凍と解凍の繰り返しを避けるため小分けにしてください	１ケ月-20°Cin solvent

In vitro
Batch:

DMSO : 25 mg/mL ( (199.79 mM)；吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Water : 25 mg/mL

Ethanol : 25 mg/mL

モル濃度計算器

in vivo
Batch:

Add solvents to the product individually and in order.

投与溶液組成計算機

実験計算

モル濃度計算器

質量	濃度	体積	分子量
=	×	×

希釈計算器分子量計算器

投与溶液組成計算機(クリア溶液)

ステップ１：実験データを入力してください。（実験操作によるロスを考慮し、動物数を1匹分多くして計算・調製することを推奨します）

投与量 mg/kg 動物平均体重 g 投与体積（動物毎）μL 動物数匹

ステップ２：投与溶媒の組成を入力してください。（ロット毎に適した溶解組成が異なる場合があります。詳細については弊社までお問い合わせください）

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

計算結果：

投与溶媒濃度： mg/ml;

DMSOストック溶液調製方法： mg 試薬を μL DMSOに溶解する（濃度 mg/mL, 注：濃度が当該ロットのDMSO溶解度を超える場合はご連絡ください。 )

投与溶媒調製方法：Take μL DMSOストック溶液に μL PEG300，を加え、完全溶解後μL Tween 80，を加えて完全溶解させた後 μL ddH₂O，を加え完全に溶解させます。

投与溶媒調製方法：μL DMSOストック溶液に μL Corn oil，を加え、完全溶解。

注意：１.ストック溶液に沈殿、混濁などがないことをご確認ください；
２.順番通りに溶剤を加えてください。次のステップに進む前に溶液に沈殿、混濁などがないことを確認してから加えてください。ボルテックス、ソニケーション、水浴加熱など物理的な方法で溶解を早めることは可能です。

技術サポート

ストックの作り方、阻害剤の保管方法、細胞実験や動物実験の際に注意すべき点など、製品を取扱う時に問い合わせが多かった質問に対しては取扱説明書でお答えしています。

Handling Instructions

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C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):