NEM (N-Ethylmaleimide)

NEM (N-Ethylmaleimide) is an organic compound that is derived from maleic acid. It is an irreversible inhibitor of all cysteine peptidases, with alkylation occurring at the active site thiol group. N-Ethylmaleimide (NEM) inactivates endogenous deubiquitinating enzymes (DUBs). N-Ethylmaleimide (NEM) specifically inhibits phosphate transport in mitochondria.

NEM (N-Ethylmaleimide)化学構造

CAS No. 128-53-0

サイズ 価格(税別) 在庫状況
10mM (1mL in DMSO) JPY 29500 国内在庫あり
JPY 22000 国内在庫あり
JPY 145500 国内在庫なし(納期7~10日)

代表番号: 045-509-1970|電子メール:[email protected]
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製品安全説明書

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Cysteine Protease阻害剤の選択性比較

Cell Data

Cell Lines Assay Type Concentration Incubation Time 活性情報 PMID
KBV1 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against drug-resistant human KBV1 cells expressing P-gp incubated for 72 hrs by MTT assay, IC50=16μM 21657271
KB-3-1 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human KB-3-1 cells incubated for 72 hrs by MTT assay, IC50=30μM 21657271
COS7 Function assay 90 mins Binding affinity to rat Galpha-fused ORL1 receptor expressed in african green monkey COS7 cells after 90 mins, EC50=43.7μM 22061823
BL21 (DE3) Function assay 30 mins Irreversible inhibition of human recombinant IDE expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) cells using ATTO 655- Cys-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Trp as substrate preincubated for 30 mins followed by 100 fold compound dilution by spectrophotometric anal 31276900
KU812 Function assay 20 mins Inhibition of SENP1 in human KU812 cells preincubated for 20 mins followed by addition of HA-SUMO1-VS as substrate measured after 2 hrs by immunoblot analysis 27491710
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生物活性

製品説明 NEM (N-Ethylmaleimide) is an organic compound that is derived from maleic acid. It is an irreversible inhibitor of all cysteine peptidases, with alkylation occurring at the active site thiol group. N-Ethylmaleimide (NEM) inactivates endogenous deubiquitinating enzymes (DUBs). N-Ethylmaleimide (NEM) specifically inhibits phosphate transport in mitochondria.
In Vitro
In vitro

N-Ethylmaleimide inactivates endogenous deubiquitinating enzymes (DUBs) and specifically inhibits phosphate transport in mitochondria.[1]

細胞実験 細胞株 HEK293T cells
濃度 10 mM
反応時間 14 h
実験の流れ

For endogenous protein immunoprecipitation, cell lysates are prepared in Pierce IP Lysis Buffer containing protease inhibitors, phosphatase inhibitor and deubiquitinating inhibitor N-Ethylmaleimide (NEM, 10mM). Lysate supernatant is firstly incubated with primary antibody at 4 ℃ for 14 h, and then mixed with Dynabeads Protein G magnetic beads at 4 ℃ for 4 h on a rotator. The magnetic bead-Ab complex is separated by Magnetic Separation Rack and the beads are washed three times with PBST buffer. For SDS-PAGE analysis, the complex-bound beads are resuspended in 1x protein electrophoresis loading buffer and boiled at 100 ℃ for 8 min before the supernatant is collected. For exogenous protein immunoprecipitation, cells are transfected for 48 h before preparation of cell lysates. To prepare negative control, antibody against mouse IgG is used in parallel.

In Vivo
In Vivo

N-Ethylmaleimide is an irreversible cysteine protease (sulfhydryl) inhibitor.

動物実験 動物モデル Male Sprague-Dawley rats
投与量 10 mg/kg
投与経路 s.c.
NCT Number Recruitment Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT00750477 Completed
Osteoarthritis
ESM Technologies LLC
December 2004 Not Applicable
NCT00750230 Completed
Osteoarthritis|Fibromyalgia
ESM Technologies LLC
October 2003 Not Applicable

化学情報

分子量 125.13 化学式

C6H7NO2

CAS No. 128-53-0 SDF Download NEM (N-Ethylmaleimide) SDFをダウンロードする
Smiles CCN1C(=O)C=CC1=O
保管

In vitro
Batch:

DMSO : 25 mg/mL ( (199.79 mM); 吸湿したDMSOは溶解度を減少させます。新しいDMSOをご使用ください。)

Water : 25 mg/mL

Ethanol : 25 mg/mL

モル濃度計算器

in vivo
Batch:

Add solvents to the product individually and in order.

投与溶液組成計算機

実験計算

モル濃度計算器

質量 濃度 体積 分子量

投与溶液組成計算機(クリア溶液)

ステップ1:実験データを入力してください。(実験操作によるロスを考慮し、動物数を1匹分多くして計算・調製することを推奨します)

mg/kg g μL

ステップ2:投与溶媒の組成を入力してください。(ロット毎に適した溶解組成が異なる場合があります。詳細については弊社までお問い合わせください)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計算結果:

投与溶媒濃度: mg/ml;

DMSOストック溶液調製方法: mg 試薬を μL DMSOに溶解する(濃度 mg/mL, 注:濃度が当該ロットのDMSO溶解度を超える場合はご連絡ください。 )

投与溶媒調製方法:Take μL DMSOストック溶液に μL PEG300,を加え、完全溶解後μL Tween 80,を加えて完全溶解させた後 μL ddH2O,を加え完全に溶解させます。

投与溶媒調製方法:μL DMSOストック溶液に μL Corn oil,を加え、完全溶解。

注意:1.ストック溶液に沈殿、混濁などがないことをご確認ください;
2.順番通りに溶剤を加えてください。次のステップに進む前に溶液に沈殿、混濁などがないことを確認してから加えてください。ボルテックス、ソニケーション、水浴加熱など物理的な方法で溶解を早めることは可能です。

技術サポート

ストックの作り方、阻害剤の保管方法、細胞実験や動物実験の際に注意すべき点など、製品を取扱う時に問い合わせが多かった質問に対しては取扱説明書でお答えしています。

Handling Instructions

他に質問がある場合は、お気軽にお問い合わせください。

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